ANALIZADOR MULTIPARAMETRICO LUMINEX 100 IS:
Sus características principales son:
1. El lúminex 100 System permite el análisis de hasta 100 inmunoensayos, complejos genéticos y ensayos enzimáticos por pocillo.
2. Placa de 96 pocillos o un solo tubo.
3. En la actualidad existe una gran variedad de kits disponibles. Kits para medición de: IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgM and IgE, Hepatitis B, SNP’s, carga viral de HIV, CV y HSV, tipaje DNA, Perfiles de transcripción, medición de citoquinas, mapeo de epitopos, marcadores cardiacos, Drogas de abuso, Test de alergia y autoinmunidad, hCG, AFP y ToRCH...
4. 9600 SNP, citoquinas, tipajes DNA etc. en una hora y cuarto.
PRINCIPIO LUMINEX
Los
reactivos de estos ensayos (anticuerpos, oligonucleótidos, sustratos,
etc.) están anclados a la superficie de microesferas de poliestireno.
El espectro de emisión de cada una de estas
microesferas es único, lo que posibilita la
identificación
simultánea de todas ellas y por tanto, de la reacción o ensayo que se
está llevando a cabo en la superficie de cada una de ellas y todos
estos procedimientos dentro del mismo tubo de reacción.
Las microesferas están marcadas con dos fluoróforos de forma que se
establece un ratio de ambos en cada una de ellas. Así tendremos la
primera de las microesferas con un 100% del primer fluoróforo y 0% del
segundo, la 2ª microesfera con 99% del primer fluoróforo y un 1% del
segundo, la 3ª con un 98% del primer fluoróforo y un 2% del segundo y
así sucesivamente hasta completar 100 microesferas perfectamente
identificables dentro del mismo tubo de reacción.
Posteriormente, las microesferas son obligadas a pasar por una
corriente de flujo. Cada una de ellas es clasificada de acuerdo al
ratio de su marcaje fluorescente interno. Además de esto, el lúminex
100 System escanea cada una de las microesferas para
determinar la
presencia o ausencia de otro fluoróforo, el cual se habrá unido o no a
los reactivos específicos de los ensayos (anticuerpos,
oligonucleótidos, sustratos, etc.) anclados en la superficie de las
esferas.
Estas esferas son partículas de poliestireno que se han sometido a la
acción del crosslinker durante su polimerización para
conseguir
una elevada estabilidad térmica y física. Para asegurar la estabilidad
de estas microesferas es esencial protegerlas de la luz así como de
elevadas temperaturas
Existen diferentes tipos de reactivos para uso con el sistema lúminex
100 IS. Hay desde microesferas de calibración con ratios conocidas de
fluoróforos hasta microesferas de control, pasando por aquellas que
presentan en su superficie desde grupos carboxilo hasta Avidina para la
unión covalente de diferentes biomoléculas y ligandos biotinilados
respectivamente, para que cada cliente pueda hibridar lo que necesite
sobre la superficie de las microesferas.