A continuación se proponen tres métodos para la congelación
de embriones de ratón. Los tres protocolos han sido utilizados con
éxito en diversos laboratorios. Ninguno de ellos requiere instrumentación
o equipo específico alguno. Solamente se necesita una lupa binocular,
las soluciones indicadas y pajuelas para conservar los embriones congelados.
Los tres métodos utilizan tres agentes crioprotectores distintos
para un mismo fin, criopreservar eficazmente embriones de ratón
pricipalmente en fase de mórula.
Los protocolos pueden descargarse como archivos rich text format (RTF).
Se incluye un cuarto método para la criopreservación específica de esperma de ratón, basado en protocolos de P.H. Glenister & C.E. Thornton (MRC MGU, Harwell, UK) adaptados de los métodos originales de K. Nakagata (Univ. Tokyo, Japan) y J. Stzein (Jackson Lab. , USA).
Finalmente se ha añadido la página WEB del Laboratorio
de Criopreservación de "The Jackson Laboratory", de visita muy recomendable.
1.- Vitrificación (Glicerol) (L. Montoliu, CNB, Madrid)
2.- Congelación ultrarrápida (DMSO) (K. Vintersen, EMBL Transgenic Service, Heidelberg, Germany)
3.- Congelación rápida (Etilenglicol)
(B. Pintado, INIA, Madrid)
4.- Criopreservación de esperma de ratón
(P.H. Glenister & C.E. Thornton, MRC
Mammalian Genetics Unit, Harwell, UK)
Laboratorio
de Criopreservación de Embriones y Esperma
(The Jackson Laboratory)
(servicios, protocolos, cursos, publicaciones...)