RESUMEN DE INVESTIGACION

Nuestros objetivos son caracterizar la implicación de las funciones de reparación del ADN y la segregación cromosomal en la estabilidad del material genético en firmicutes. Para ello se utilizan dos modelos experimentales.

Bacillus subtilis se usa para estudiar el papel de las proteínas de recombinación en la mecánica de la reparación de ADN y el plásmido pSM19035 para estudiar a la estabilidad segregacional.

Usando al primer modelo se ha demostrado que:

i) la proteína RecN promueve el reclutamiento dinámico de los extremos del DNA,

ii) el complejo AddAB o RecJ en conjunto con una helicasa de la familia RecQ generan los extremos de ssDNA en los sitios de corte del ADN, con RecN promoviendo la re-localización de las proteínas de recombinación en los centros de reparación,

iii) diferentes mediadores (por ejemplo RecO, RecU, etc) modulan a la recombinasa RecA y

iv) las tranlocasas RecG or RuvAB-RecV en conjunto con la resolvasa RecU procesan a las estructuras de Holliday (intermedios de recombinación).

Usando el segundo modelo se ha demostrado que:

i) el papel delregulador global del plásmido, la proteina ω [que es un dímero (ω₂) en solución], es controlar el número de copias, la segregación plasmídica y la expresión de las proteínas ε y ζ,

ii) la proteína ω₂ se une a una región centromérica envolviendo el DNA (como se puede observar en la figura de abajo) y la proteína δ₂ después de interaccionar con ω₂ promueve al apareamiento de los plásmidos y filamenta en el DNA,

iii) el desensamblado de δ₂ depende de la estequiometría de ω₂: δ₂ en el complejo nucleoproteíco.

Los principios que sostienen la replicación cromosomal, la reparación y la segregación en procariotas y en eucariotas comparten similitudes y diferencias que estamos intentando identificar y comprender.