El Dr. Lluís Montoliu, investigador científico del Centro Nacional de Biotecnología del CSIC, y coordinador del nodo español del Proyecto Europeo EMMA (European Mouse Mutant Archive), preside la organización del Cryopreservation Workshop en 2012 que se celebrará en Madrid, en la sede central del CSIC, los días 7 y 8 de mayo de 2012.

Desde EMMA, esta reunión sobre criopreservación se plantea como un foro para discutir al más alto nivel y en profundidad, los últimos avances tecnológicos en la criopreservación de líneas de ratones. Estas técnicas incluyen la criopreservación de esperma y de embriones, métodos actualizados de fecundación in vitro (FIV) y técnicas relacionadas, como criopreservación de ovarios, inyección intracitoplasmática de esperma (ICSI) asistida por laser y piezoinyectores, transporte de material biológico congelado y cualquier otra técnica o reto logístico relevante para el funcionamiento normal de los bancos actuales de embriones y esperma.

Esta será una reunión limitada, con la asistencia prevista de 60 participantes, por invitación, que incluyen los mejores expertos del campo a nivel mundial. Esta reunión está copatrocinada por la International Society for Transgenic Technologies (ISTT) y 10 de sus miembros han sido seleccionados para asistir a partir de las solicitudes recibidas. Los participantes invitados son:

• de los EEUU: Rob Taft, Michael Wiles, Kent Lloyd, Jorge Sztein, Carlisle Landel, Peter Mazur;
• de Canadá: Marina Gertsenstein, Lauryl Nutter;
• de Latino-América: Martina Crispo;
• de Australia: Stuart Read, Sue Bath;
• de China: Xiang Gao;
• de Japón: Naomi Nakagata, Toru Takeo, Keiji Mochida, Atsuo Ogura;
• de Europa: Martin Fray, Pedro Moreira, Alan Hart, Xavier Warot, Jean Jaubert, Marcello Raspa, Sagrario Ortega y Belén Pintado.
  

La revista Structure acaba de publicar el trabajo del grupo de Cristina Risco en el que desarrollan un marcador clonable para la detección de forma individual de una o varias proteínas por microscopía electrónica.

La microscopía electrónica ha contribuido más que ninguna otra metodología a nuestra comprensión de la arquitectura y organización celular. Sin embargo, la detección de proteínas en células a nivel ultraestructural sigue realizándose hoy en día mediante técnicas de inmunomarcaje que no tienen ni la sensibilidad ni la resolución que cabría esperar del uso de los microscopios electrónicos. De ahí que se siga intentando desarrollar nuevas técnicas que permitan identificar de forma directa y de manera cuantitativa las moléculas individuales de las proteínas en el denso entorno intracelular.

El nuevo marcador que ha patentado el CSIC junto con el método utilizado para su visualización denominado Metal-Tagging Transmision Electron Microscopy (METTEM), contiene la secuencia de una pequeña proteína que une metales y le permite formar nanopartículas de 1 nm fácilmente detectables con el microscopio electrónico. La propia Dra. Risco explica que este nuevo método "permite la detección de proteínas en células con gran especificidad, sensibilidad excepcional y resolución molecular".

Como se puede apreciar en la imagen, este marcador (METTEM) tiene una sensibilidad superior en varios órdenes de magnitud a la proporcionada por los anticuerpos en ensayos de inmunomarcaje (Immunogold). Por ello, presenta grandes perspectivas para la visualización y el estudio de las biomoléculas en su entorno celular nativo. La trascendencia en el campo de la microscopía electrónica es potencialmente similar a la alcanzada por las proteínas fluorescentes en microscopía óptica.

Entre probetas - Microscopia electrónica sensible - 26/06/12

• Entre probetas - Microscopia electrónica sensible - 26/06/12
  

El Centro Nacional de Biotecnología acogió el pasado 13 de abril de 2012 la primera reunión del Grupo de Hepatitis Víricas de la Sociedad Española de Virología.

Este primer encuentro, organizado por el Dr. Pablo Gastaminza, ha reunido a más de ochenta investigadores básicos, clínicos y epidemiológicos alrededor de un tema común, el virus C de la hepatitis (HCV). Este virus afecta a un 2% de la población española, y, tras una infección aguda, el 80% de los pacientes desarrollan una hepatitis crónica para la cual el único tratamiento es la terapia combinada de interferón alfa y ribavirina y cuya eficacia no supera el 60%. A pesar de la reciente aprobación de nuevos fármacos frente a este virus, existen serias limitaciones de índole médico, epidemiológico y económico para el tratamiento adecuado de los pacientes infectados por este patógeno. De ahí la importancia de estudiar la biología del virus, la prevalencia real de la infección para identificar a portadores inadvertidos, que son la mayoría de los infectados, y los protocolos médicos óptimos de cara a desarrollar métodos efectivos para controlar una epidemia de gran magnitud a escala mundial.

En esta jornada se han podido escuchar, además de la situación actual y los futuros retos expuestos por los Coordinadores de Área del Grupo, los últimos avances de los científicos españoles en áreas tan diferentes de la biología del virus como su interacción con factores celulares que participan en procesos de regulación de la traducción celular, la estructura que adopta el RNA viral y sus requerimientos funcionales, o la visualización de los primeros procesos de formación de partículas virales en 3D. Todas ellas forman parte de las últimas estrategias destinadas a encontrar dianas para nuevos fármacos antivirales, una tarea en la que se aúnan esfuerzos de grupos de investigación básica y clínica.

En la parte clínica hay que destacar el esfuerzo dedicado al desarrollo de medicamentos con menores efectos secundarios, o la búsqueda de factores genéticos del paciente que ayuden a definir mejor su respuesta al tratamiento. La reciente aprobación de dos nuevos fármacos (inhibidores de la proteasa viral) abre nuevas esperanzas para los pacientes afectados por el genotipo 1. Su uso puede conseguir la respuesta al tratamiento hasta en un 79% en pacientes que no hayan recibido tratamiento previo, y en un 60% en pacientes con recaídas previas. Sin embargo, aún quedan por definir en el Ministerio de Sanidad los protocolos de inclusión de pacientes en este nuevo tratamiento cuyo coste directo es actualmente inasumible por la sanidad pública española.  Finalmente se presentaron las metodologías empleadas por organismos oficiales para la monitorización de brotes de casos de VHC, así como trabajos de caracterización de vías de transmisión materno-infantil y potenciales variantes virales circulantes.

Además, la reunión contó con la presencia del Dr. Charles M. Rice, director del Centro de Investigación de Hepatitis C de la Universidad Rockefeller en Nueva York. Su conferencia se centró en los últimos avances desarrollados para conseguir nuevos modelos celulares y animales que permitan estudiar en mayor profundidad  los procesos que acontecen durante la infección por el HCV. De su más reciente trabajo cabe destacar el desarrollo de un modelo murino de infección por el virus de la hepatitis C. Dicho modelo permite, gracias a la introducción de una serie de receptores humanos en el genoma del ratón, reproducir el ciclo completo del virus en ratones, una quimera perseguida por cientos de laboratorios en el mundo que se ha hecho realidad en el laboratorio del Dr. Rice y que va a acelerar notablemente los estudios preclínicos para el desarrollo de nuevos fármacos.

En la mesa redonda posterior en la que participaron como ponentes los coordinadores de área del Grupo de Hepatitis Víricas Dr. Antonio Mas (Área básica), Dr. Javier García Samaniego (Área Clínica) y Dr. José Manuel Echevarría (Área Diagnóstico-Epidemiológica) junto al Presidente de la SEV , Dr. Esteban Domingo, y el miembro de la Junta Directiva de la SEV Dr. Albert Bosch, se ha insistido en las ventajas que proporciona la creación de este grupo de trabajo como vehículo de que permita una mayor comunicación entre investigadores básicos, clínicos y epidemiológicos con un objetivo común. Hasta ahora, se han inscrito 28 grupos de investigación, y se espera que la participación pueda aumentar, incluyendo un mayor número de colectivos científicos con interés en las hepatitis víricas. Para más información, se puede contactar con el Dr. Antonio Mas, coordinador del Grupo.


Fotografías del evento en: http://www.cnb.csic.es/~foto/Sitio_web/WorkShop_Hepatitis_C.html

Cada año, las mutaciones incorporadas en el genoma del virus de la gripe hacen necesaria la revacunación anual y el control por parte de las autoridades sanitarias para evitar pandemias. Con el objetivo de encontrar inhibidores de la actividad viral, diferentes grupos de investigación en todo el mundo trabajan para conocer mejor el mecanismo de la replicación viral y definir los factores celulares necesarios que puedan ayudar a controlar la infección.

El virus de la gripe se transcribe y replica en el núcleo de la célula infectada. Una vez que las ribonucleoproteínas (RNPs) que forman el genoma viral llegan al núcleo, sirven como molde para comenzar la transcripción primaria de los factores virales necesarios para la replicación viral y la transcripción secundaria. Existe una estrecha colaboración entre la maquinaria de transcripción viral y la celular. Para definir qué elementos celulares pueden ser importantes para el virus, en el CNB, El grupo del Dr. Juan Ortín ha analizado la interacción de la RNA polimerasa viral con proteínas celulares. Su último trabajo, publicado en la revista PLoS Pathogens, muestra el papel de una de estas proteínas, el factor de splicing SFPQ, en la infección viral.

SFPQ es un factor que actúa tanto en la transcripción como en el splicing de mRNAs celulares. En relación a su papel en la infección causada por el virus de la gripe, los investigadores han observado que la disminución de los niveles de SFPQ afecta drásticamente a la producción de virus de la gripe, mientras que la multiplicación de otros virus como VSV o Adenovirus 5 son independientes de la presencia de SFPQ en la célula. Los autores han analizado en qué pasos del ciclo viral puede ser necesario SFPQ mediante el uso de infecciones en líneas celulares humanas o utilizando un sistema de replicones que permite analizar la replicación viral in vitro.

Estos experimentos han servido para demostrar de una forma muy elegante que la interacción de SFPQ con la RNA polimerasa viral es necesaria para producir mRNAs virales correctamente poliadenilados, un paso temprano del ciclo viral. La inhibición de esta interacción podría ser utilizada como diana para el desarrollo de antivirales específicos para el virus de la gripe.

En una jornada científica, investigadores de la Windpowered Antarctica's Challenge de la que formó parte Juan Pablo Albar, hablarán sobre los trabajos científicos que se llevan a cabo en este continente. A parte de demostrar la viabilidad de viajar en la meseta antártica con trineos movidos exclusivamente con la fuerza del viento, los científicos participantes han dedicado su tiempo a diversos experimentos que nos explicarán el próximo 27 de marzo de 2012.

Hasta ahora, se aceptaba que los virus cuyo genoma está formado por RNA de cadena positiva no incorporaban proteínas implicadas en la replicación viral en sus viriones. Sin embargo, estudios más recientes están modificando esta hipótesis.

En esta dirección, el grupo supervisado por los doctores Luis Enjuanes y Fernando Almazán ha analizado mediante espectrometría de masas el contenido proteico de las partículas del coronavirus de la gastroenteritis transmisible (TGEV). Sus resultados, publicados en la revista Journal of Virology, muestran que en la partícula del TGEV no sólo están presentes proteínas estructurales del virus, sino también proteínas celulares como la calnexina, tubulina b5 o Hsp90AB ya identificadas en otros coronavirus como el causante del SARS (SARS-CoV) o de la bronquitis en aves.

El resultado más interesante es la identificación de la RNA polimerasa viral responsable de la replicación del virus (RdRp)  dentro del virión. Mediante técnicas de microscopía electrónica de transmisión y microscopía confocal, se ha confirmado la presencia específica de la RdRp dentro de la partícula viral junto con otras proteínas virales implicadas en los procesos de replicación y transcripción viral como nsp2, nsp3 y nsp8.

Este nuevo hallazgo sugiere que la incorporación en los viriones de proteínas virales con un papel importante en los pasos iniciales de la replicación viral puede ser un mecanismo más general utilizado por diferentes familias de virus para producir una infección más eficiente.

Nogales A, Márquez-Jurado S, Galán C, Enjuanes L, Almazán F. Transmissible Gastroenteritis Coronavirus RNA-Dependent RNA Polymerase and Nonstructural Proteins 2, 3, and 8 Are Incorporated into Viral Particles. J Virol. 2012 Jan;86(2):1261-6.

El próximo jueves, 15 de marzo, la secretaria de Estado de Investigación, Desarrollo e Innovación, Carmen Vela, entregará en la sede del Consejo Superior de Investigaciones Científicas (CSIC) los premios Fundación Biogen Idec para Jóvenes Investigadores Españoles. Estos galardones se iniciaron como una colaboración entre la Fundación Biogen Idec y el Centro Nacional de Biotecnología del CSIC y pretenden reconocer el mejor trabajo de investigación básica desarrollado por jóvenes científicos en las áreas de Neurología e Inmunología.

La sexta edición premia en el área de Neurología la labor de Manuel López Aranda, investigador de la Universidad de California, por su contribución al descubrimiento del papel funcional de una población de neuronas asociada a la formación de la memoria visual. En el área de Inmunología, el reconocimiento por parte del jurado ha sido para la investigadora Laura Belver, del Centro Nacional de Investigaciones Cardiovasculares, por la novedad y las implicaciones terapéuticas que tiene la demostración del papel esencial que juegan los micro-ARNs en la diferenciación terminal de los linfocitos B, la generación de auto-anticuerpos y el mantenimiento de la tolerancia inmunológica.

En su dictamen el jurado de los premios Biogen Idec ha destacado la calidad de los trabajos recibidos, así como la de los curricula de los participantes, “lo cual es una muestra más del altísimo nivel de la investigación conseguido por los jóvenes investigadores españoles”.

En el acto de entrega participarán el vicepresidente de Investigación Científica y Técnica del CSIC, Antonio Figueras, y el investigador del departamento de Inmunología y Oncología del Centro Nacional de Biotecnología (CSIC), Carlos Martínez, que impartirá la lección magistral "Impacto de la Biología en la Medicina del Siglo XX".

Fruto de la colaboración con los grupos de Andrzej Dziembowski en la Academia Polaca de Ciencias y del Dr. Andrés Aguilera de la Universidad de Sevilla, el grupo de José María Valpuesta acaba de publicar en la revista EMBO Journal la estructura de un complejo de proteínas esenciales para la formación del ARN mensajero y su transporte desde el núcleo al citoplasma. Sus resultados revelan un nuevo mecanismo por el que la formación de este complejo proteico reconoce a los ácidos nucleicos y se une a ellos.

Como la transcripción del ADN tiene lugar en el núcleo de la célula y los ribosomas que forman las proteínas se encuentra en el citoplasma, un paso esencial para la expresión de cualquier gen es el transporte del ARN mensajero desde el núcleo hasta el citoplasma. Un proceso que se conoce desde hace bastante tiempo, pero cuyos detalles no se han investigado del todo.

Se ha descrito que el complejo de proteínas THO está directamente relacionado con la transcripción, formación y transporte del ARN mensajero. Sin embargo, todavía no se ha descrito de forma clara ni su estructura ni su mecanismo de acción. El principal motivo es principalmete que este grupo de proteínas es tan poco soluble que ha sido imposible purificarlas en cantidades suficientes como para estudiarlo mediante cristalografía de rayos X.

En el Centro Nacional de Biotecnología del CSIC, el grupo de José María Valpuesta en colaboración con el grupo polaco, ha sido capaz de producir estas proteínas en suficiente cantidad y pureza como para poder ser analizadas mediante microscopía electrónica. De este modo, usando esta técnica en combinación diferentes sistemas de marcaje de proteínas, han sido capaces de elaborar un modelo a nivel atómico. En contra de lo que se creía hasta ahora, con su reconstrucción tridimensional han descubierto que el complejo no tiene cuatro sino cinco proteínas distintas. Y todo parece indicar que entre las funciones de este nuevo componente estaría la de unirse a otras proteínas que intervienen en el procesado, empaquetamiento y transporte del ARN mensajero.

Además, los tres grupos involucrados en el trabajo han sido capaces de identificar y localizar la zona de este complejo que se une de forma directa a los ácidos nucleicos, que como explica Valpuesta "es una región desestructurada que se encuentra en una de las proteínas del complejo". La relevancia de esta unión se pone de manifiesto por el hecho de que si se ve alterada se llega a producir un alto grado de inestabilidad genómica.

Miguel Vicente organiza en el Real Sitio de San Ildefonso el EMBO Workshop Reconstructing the essential bacterial cell cycle machinery. Del 16 al 19 de septiembre de 2012, los participantes tendrán la oportunidad de debatir los avances en la construcción de maquinarias bacterianas en ausencia de células. Los ponentes se centrarán especialmente en los componentes bacterianos implicados en procesos esenciales como la citocinesis, la segregación de los cromosomas y la síntesis de la pared bacteriana.

El Centro Nacional de Biotecnología del CSIC (CNB) acaba de firmar un acuerdo que permitirá almacenar y distribuir embriones y esperma de los ratones modificados genéticamente que se generan en el Centro Nacional de Investigaciones Oncológicas (CNIO). A través del European Mouse Mutant Archive (EMMA), los investigadores del CNIO podrán conservar en el CNB sus líneas de ratones. De este modo están disponibles para la investigación de cualquier científico interesado.

Desde que en enero de 2009 el CNB se convirtiera en el nodo español de EMMA bajo la dirección de Lluís Montoliu, la comunidad científica española ha tenido más fácil el acceso libre a todas aquellas líneas de ratones transgénicos, knockouts o mutantes de interés para la investigación biomédica. A las líneas ya existentes se sumarán ahora aquellas provenientes del trabajo de los investigadores del CNIO, aumentando así la disponibilidad de estudiar la función de multitud de genes con interés en el campo de la oncología.

Al ser un proyecto financiado por la Comisión Europea, la congelación y mantenimiento de ratones en condiciones EMMA es gratuita y el investigador sólo se debe responsabilizarse de los costes de traslado de sus modelos animales al nodo EMMA correspondiente (el CNB en Madrid, en este caso). Esto implica el acceso libre de los modelos animales depositados por la comunidad científica. No obstante, pueden asociarse a cada línea criopreservada en EMMA documentos que protejan la propiedad intelectual de los ratones depositados y puede solicitarse un periodo de hasta 2 años durante los cuales la línea está depositada en EMMA pero no aparece todavía en las bases de datos.

El nodo EMMA incluye la utilización de aisladores de jaulas de ratón, para permitir la recepción segura de ratones cuyo informe sanitario sea distinto al de los ratones alojados en el animalario del CNB. Se pretende con ello universalizar la criopreservación de líneas de ratón y ponerla a disposición de todos los investigadores interesados, con independencia de las características del animalario de origen.